本次的主題(tí)主要(yào)針(zhēn)對(duì)aw系列(liè)産品的技術特(tè)點進行詳細介(jiè)紹,主要分爲溫(wēn)控、高(gāo)通(tōng)量、高回(huí)收率三大技術(shù)特點(diǎn)。溫控和高(gāo)通量我(wǒ)們已經(jīng)在前兩期(qī)中詳(xiáng)細的介(jiè)紹了,最(zuì)後一期我(wǒ)們介紹一(yī)下aw産品的(de)高回收率技術(shù)特點在western blot實驗中(zhōng)的具體應用。
全自動清洗工作(zuò)站高回收率技(jì)術特(tè)點(diǎn)介(jiè)紹
本(běn)次的主題主要針對aw系列産品(pǐn)的技(jì)術(shù)特點進行詳細介(jiè)紹,主(zhǔ)要分爲溫(wēn)控、高(gāo)通量、高(gāo)回收率(lǜ)三大技(jì)術(shù)特點。溫控(kòng)和高通量(liàng)我們(men)已經(jīng)在前(qián)兩期中詳(xiáng)細的(de)介紹了,最(zuì)後一(yī)期我們介紹一(yī)下aw産品(pǐn)的高回(huí)收率(lǜ)技(jì)術(shù)特點(diǎn)在western blot實驗中的(de)具體應用。
抗(kàng)原-抗(kàng)體免(miǎn)疫(yì)反應
western blot實驗的(de)步驟和原(yuán)理我們在前幾(jǐ)期中(zhōng)已經詳細(xì)的介(jiè)紹過了,本(běn)期就(jiù)不再複述(shù)了,在(zài)western blot步驟中抗(kàng)原-抗體免疫反(fǎn)應(一抗孵育、二抗孵(fū)育)這一步非常的重(zhòng)要,其(qí)實也就是抗體(tǐ)很重要。
目前一(yī)抗在(zài)選擇時更多的還(hái)是(shì)傾向(xiàng)于國(guó)外的一些品牌,優勢是種(zhǒng)類多(duō),條(tiáo)帶清晰(xī),但價格高、貨(huò)期久;國産的(de)品牌(pái)随着技術(shù)的不斷進(jìn)步,抗體的(de)質量也有(yǒu)很大(dà)進步,然而質量(liàng)好的抗體(tǐ)雖然(rán)貨期(qī)短(duǎn),但價格(gé)也相對(duì)較高,抗體種類(lèi)少;然而(ér)無論選擇國産(chǎn)還是(shì)進口(kǒu),抗體(tǐ)的價格(gé)都是需要考(kǎo)量的(de)。
因此從(cóng)實驗(yàn)成(chéng)本上(shàng)看抗(kàng)體的重複(fú)使用率就(jiù)顯得尤爲(wèi)重要,抗體(tǐ)能否多次(cì)重複使用,主(zhǔ)要取決(jué)于兩方面:
孵(fū)育(yù)溫度(dù)和回(huí)收率
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低溫條件(jiàn)孵育(yù)抗體不僅可以使抗原抗(kàng)體充(chōng)分結(jié)合,還能夠(gòu)提高(gāo)抗體(tǐ)的重(zhòng)複利(lì)用率(lǜ),然而(ér)即使抗體活性良好(hǎo),但回收率(lǜ)不高依然(rán)不能多次重複(fú)使用(yòng),兩者相(xiàng)輔相成,缺一(yī)不可。對于(yú)孵育的溫度條(tiáo)件,已(yǐ)經在介(jiè)紹(shào)溫控技(jì)術(shù)特點時做(zuò)了介紹,下(xià)面我(wǒ)們通過實(shí)驗數據(jù),更加直(zhí)觀的(de)讓(ràng)大家了(le)解aw産品的(de)高回(huí)收率的(de)技術特(tè)點。
aw-04/08/12
aw-04/08/12全(quán)自動(dòng)清洗(xǐ)工作站抗體回(huí)收率(lǜ)=孵(fū)育(yù)後回(huí)收抗(kàng)體量(liàng)/孵育(yù)前準備的抗體(tǐ)量
aw-04
aw-08
aw-12
從上(shàng)面(miàn)抗體回收(shōu)率的數據(jù)結果表(biǎo)明aw-04/08/12三款全自動清洗工(gōng)作站抗體的平(píng)均回收率>97%,并且(qiě)經實驗(yàn)證明此(cǐ)抗體回收率完(wán)全滿足多次重複使(shǐ)用(yòng)的(de)要求,大大節約了實(shí)驗成本(běn)。