細(xì)胞培養

細胞(bāo)培(péi)養過程(chéng)中即使我(wǒ)們再小心翼翼，還是(shì)會在不經(jīng)意間出現細胞污染(rǎn)的情(qíng)況，導緻實(shí)驗無(wú)法繼續進(jìn)行，可能是(shì)準備(bèi)已久的實驗，一(yī)下子(zǐ)又(yòu)回到了起點。本(běn)期就細胞污染的常見類(lèi)型簡單向大(dà)家介紹(shào)一下。

實(shí)驗室細(xì)胞(bāo)培養過程中的污染(rǎn)物主(zhǔ)要有兩大(dà)類：化學污(wū)染和生物污(wū)染物。

一、化學污染(rǎn)

主要(yào)有培養(yǎng)基、pbs、血清和胰(yí)酶(méi)等(děng)試劑(jì)中(zhōng)的雜質，内毒(dú)素，洗滌劑殘留等。因此許(xǔ)多試(shì)劑在使用前需要過(guò)濾(lǜ)，清洗的(de)物品一(yī)定要用(yòng)超純(chún)水多清洗(xǐ)幾次并高(gāo)溫高(gāo)壓滅(miè)菌後使用(yòng)。

二、生物污(wū)染

01 細(xì)菌污染

主要有(yǒu)白色葡萄球菌(jun1)，大腸杆菌(jun1)，假單(dān)孢菌、枯(kū)草(cǎo)杆菌(jun1)等；細(xì)胞被污染(rǎn)後培養基會很(hěn)快變黃變渾(hún)濁，在顯微鏡(jìng)下可(kě)觀察(chá)到(dào)細胞間(jiān)有細小菌體移(yí)動，在(zài)數(shù)小時内(nèi)會出現(xiàn)細胞脫(tuō)落漂浮，培養液(yè)中呈細沙(shā)狀。這種污染通常是(shì)操作(zuò)不規範或(huò)無菌措施不(bú)到(dào)位等引起(qǐ)的。

02 黴菌污(wū)染(rǎn)

常(cháng)見的(de)有白(bái)念珠菌、酵(jiào)母菌、黑曲黴、孢(bāo)子菌等；細胞污(wū)染後(hòu)可明(míng)顯觀察到呈(chéng)現(xiàn)串珠(zhū)狀的(de)白色或黃(huáng)色漂浮物，顯微(wēi)鏡下可見(jiàn)絮狀(zhuàng)交錯的菌(jun1)絲或(huò)串珠(zhū)狀的(de)透明(míng)菌團生長在細(xì)胞(bāo)之間，污染速(sù)度較(jiào)慢，培養基(jī)依舊清(qīng)澈，後期(qī)會在細胞(bāo)間出現很(hěn)多清晰珊(shān)瑚(hú)狀(zhuàng)物，逐漸會(huì)長出(chū)黑色絲(sī)狀(zhuàng)物。這種污(wū)染通常也是操作不規範或(huò)無菌措(cuò)施不到位等引(yǐn)起的。

03 支原(yuán)體污染

細(xì)胞被支原體污(wū)染(rǎn)後(hòu)，培養液可(kě)不發(fā)生渾(hún)濁，短期内(nèi)細胞(bāo)沒有(yǒu)明(míng)顯的病(bìng)理變(biàn)化，細(xì)微變(biàn)化也可由(yóu)于傳(chuán)代、換液而(ér)被緩(huǎn)解，因(yīn)此不易被(bèi)發現(xiàn)。隻(zhī)有當污染嚴重時才影(yǐng)響細胞增殖，甚至從(cóng)培養(yǎng)器皿脫落(luò)。支(zhī)原體可(kě)以與(yǔ)宿主(zhǔ)細胞(bāo)形成一(yī)個(gè)共生(shēng)關系(xì)，使污染不斷擴大。主(zhǔ)要來源于是已(yǐ)感染(rǎn)支原體細(xì)胞之間的(de)交(jiāo)叉(chā)污染(rǎn)，支原體(tǐ)感染的血清和胰酶等(děng)。在情況較輕時(shí)可使(shǐ)用支原體(tǐ)清除劑。

04 黑膠蟲(chóng)污染

污染後培(péi)養液不會(huì)渾濁(zhuó)，在高倍鏡下可(kě)觀察(chá)到細(xì)胞(bāo)間(jiān)有黑色顆(kē)粒在(zài)原地進(jìn)行“布朗(lǎng)運動”，像小蟲遊(yóu)來遊去(qù)。随着污(wū)染加(jiā)重，被污染的細胞(bāo)生(shēng)長緩(huǎn)慢，細胞狀态差(chà)，空泡化嚴重，甚(shèn)至還可(kě)能導緻(zhì)細胞形态的改變。污染源主要(yào)來自于血(xuè)清，如果出(chū)現污染，更(gèng)換血(xuè)清。

05 病毒污染

被污(wū)染的細(xì)胞不會産生形态變化(huà)及細胞(bāo)病理現象，培養(yǎng)液清澈不混濁(zhuó)，少部分病(bìng)毒會(huì)造成(chéng)細(xì)胞變圓、腫脹，脫落(luò)。病毒可能來源于血(xuè)清(qīng)。

06 細胞(bāo)交叉污染

在(zài)顯微(wēi)鏡(jìng)下(xià)可觀察到部分(fèn)細胞形态(tài)與所(suǒ)培養(yǎng)的細胞形(xíng)态有明(míng)顯(xiǎn)差異(yì)，可能是兩種或(huò)兩種(zhǒng)細胞以上(shàng)的實驗同(tóng)時進(jìn)行，操作(zuò)不(bú)當，使(shǐ)實驗耗材、試劑等混用而易造(zào)成的污染。

細胞(bāo)培養中(zhōng)每次出現污染，不僅要(yào)丢(diū)棄(qì)污染的細(xì)胞、檢(jiǎn)查各種試(shì)劑，還(hái)需要(yào)對培(péi)養箱進行徹底(dǐ)的殺(shā)菌(jun1)消毒，我們緻力(lì)研發的(de)二氧(yǎng)化碳細胞(bāo)培養箱(xiāng)配備高溫滅(miè)菌功(gōng)能（可(kě)選“濕熱滅菌”），接(jiē)近過(guò)度滅殺（1012）的(de)标準要求(qiú)，歡迎(yíng)咨詢(xún)。

标(biāo)簽：捷美(měi)（118） 細胞培養（11） 污(wū)染（1） 實驗（12） 培(péi)養箱（55）